其实无需做大量调研,只要关注“岛津应用云”公众号就可以了解到很多相关信息。
现在就让小编带您深入了解岛津在线液相实时监控系统。该套系统通过对传统液相的自动进样器进行改造,可以同时和多个灌流培养生物反应器(发酵罐)相连(图1),实时监控多个生物反应器在细胞培养过程中各个化合物的变化趋势,方便在第一时间发现问题,紧急采取应对措施,及时止损,该套在线液相监控系统已在2021年8月获得专利授权(中国实用新型,专利号:ZL202023017774.5)。
其中后端检测器,可以根据实际情况进行搭配。如果只需要监控细胞培养上清液中的氨基酸组分,可以选择紫外检测;如果想同时监控多类化合物的变化趋势,例如同时分析氨基酸类、糖类、维生素类、核苷类等,可以选择三重四极杆质谱配套岛津细胞培养上清液分析方法包。
案例分享1:在线监控氨基酸类化合物(在线液相实时监控系统+紫外检测器)
自动在线取样器定时吸取细胞上清液后,根据软件设定的程序,对样品进行自动柱前衍生,无需人为干涉,衍生完成后触发自动进样器进样分析,下图为检测到的氨基酸色谱图。
图2. 氨基酸自动柱前衍生色谱图
注:不同的培养方案监控的氨基酸不一样,此图仅为举例。
案例分享2:同时在线监控100多种化合物(在线液相实时监控系统+三重四极杆质谱+细胞上清液方法包)
当需要同时检测细胞上清液多类化合物时,可以在在线液相实时监控系统后端配置三重四极杆质谱仪,结合已获得专利授权的细胞上清液分析技术(中国发明专利,专利号:ZL201610888146.3),17分钟可以同时快速分析细胞上清液中125种化合物,包括4种糖、60种氨基酸及其代谢物、31种核苷及其代谢物、15种维生素类以及15种其他类化合物(图3)。
图3. 同时分析细胞上清液中100多种化合物LC-MS/MS色谱图
案例分享3:多个生物反应器在线监控
在线液相实时监控系统可以连接多个生物反应器,依次进行分析(表1)。通过软件设置不同生物反应器的采样时间,例如,第一天早上,9点,1#生物反应器采样并进行分析;10点,2#生物反应器采样并进行分析……以此类推;第二天同一时间点进行同一生物反应器的第二次取样,以此类推,直至细胞培养结束。
表1. 一套在线液相实时监控系统监控6个生物反应器时间表
软件采集的数据经过Multi-omics Analysis Package软件进一步处理后生成归类趋势图。
图4. 某细胞上清液中检测到的化合物相对含量变化趋势图
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