探讨ELISA试剂盒曲线出现问题的原因

导读:探讨ELISA试剂盒曲线出现问题的原因

标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了结:


一、OD值不正常的可能原因是:


1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃;


2、温度控制不好,控制正确温度;


3、孵育时间不准确,控制孵育时间;


4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干;


5、阳光直射,对着风直接吹,避风避;


6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm;


7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体;


8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。


二、白板的可能原因是:


1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液;


2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。


三、无梯度可能原因是:


1、标准品也污染,换标准品点板;


2、OD值不正常,控制温度时间在做一次;


3、人为点板,不要点板。


四 线性不好可能原因是

OD值不正常,控制温度时间在做一次。

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