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PCR技术的主要步骤如下：
1、dna变性：（90℃-96℃）：在热作用下，双链dna模板的氢键断裂，行程单链dna。
2、退火：（60℃-65℃）：体系温度降低，引物与dna模板结合形成部双链。
3、延伸：（70℃-75℃：以dntp为原料，在taq酶的作用下（72℃左右），以dntp为底物，从引物的3′端开始，从5′→3′端延伸，用模板法合成互补dna链。
每一个周期都被变性、退火和延长，使dna含量加倍。现在有些pcr即使taq酶活性不是*的，也能在很短的时间内复制，因为扩增区域很短。
因此，可改为两步法，即在60℃-65℃同时进行退火和延伸，以减少一次升温和降温过程，提高反应速度。
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