大鼠酶联免疫试剂盒使用方式及注意事项

导读:大鼠酶联免疫试剂盒使用方式及注意事项


大鼠酶联免疫试剂盒使用方式:

1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液*的采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
2、采集血清时,一般要加入体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4℃静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
3、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存备用;
4、采集血浆时一般不加抗凝剂,采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml离心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理。
检测试剂盒基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。

大鼠酶联免疫试剂盒注意事项:
1.保用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
2.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
3.加入试剂的顺序应*,以保证有反应板孔温育的时间一样。
4.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
7.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
8.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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