AzureCielo™实时荧光定量PCR系统可快速可靠地检测新冠病毒- 工业快报

AzureCielo™实时荧光定量PCR系统可快速可靠地检测新冠病毒

产业资讯 / 来源：工业快报 / 作者：工业快报 / 发布时间：2021-11-04

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在应对病毒性大流行疾病时，为了有效控制病毒传播和减少感染人群，快速且可靠的诊断是至关重要的。那么目前检测COVID-19的 "黄金标准 "依赖于一种成熟的技术，即反转录定量聚合酶链反应，也叫RT-qPCR。简而言之，这一程序包括RNA提取、逆转录成互补DNA或cDNA，以及用热循环仪对转录本（病毒基因组的特异性）进行实时定量。

为了早期检测和诊断，实时荧光定量PCR仪必须能够检测非常少量的病毒RNA。研究表明，检测限(LOD)或以>95%置信度检测到的最低RNA浓度，表示每1μL可能只有1拷贝的病毒RNA。因此，我们准备用COVID-19 RNA来确定Azure Cielo™的LOD。

材料和方法

Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的LOD或分析灵敏度使用FDA批准的COVID-19 genesig® Real-Time PCR assay进行检测，如使用说明书（IFU）所述。使用试剂盒提供的阳性对照模板（PCT）生成6点标准曲线，如下所示：

▲ 表1. PCT系列稀释液

SARS-CoV-2全基因组RNA从欧洲病毒全球档案馆（EvaG）获得，并按照IFU中的描述进行连续稀释，每个稀释液进行20次重复。

结果和讨论

通过表1的PCT稀释液得到标准曲线（图1），将病毒RNA/μL的拷贝数与Cq值关联起来。

▲ 图1. 标准曲线

数据显示，在12.5cp/μL、1.25cp/μL和0.625cp/μL时，Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统均检测到20/20（100%）的重复，Cq平均值分别是30.49（图2，绿色）、33.66（图2，黄色）和34.80（图2，橙色）。在0.06cp/μL时，检测到12/20（60%）的重复，Cq平均值37.12（图2，红色）。