罗氏诊断推出LightCycler®PRO系统同时支持RUO和IVD检测

近日，罗氏诊断宣布对其旗舰产品LightCycler^® qPCR系统最近进行了重大的发展，以满足当前分子检测的趋势。

新推出的LightCycler^® PRO旨在最终取代LightCycler^® 480，其特点是罗氏希望为研究和临床领域的客户，以及那些希望将研究用分析转化为体外诊断测试的客户提供服务。

LightCycler^® PRO的新特性包括更新的硬件和软件以及专用的工作流程，使用户能够运行仅使用分析的研究，以及IVD测试、七个光学通道和增强的热循环温度控制。

LightCycler qPCR系统

罗氏公司将PRO描述为具有“现代外观和感觉”，具有40厘米的触摸屏，以及远程连接、LIS和以太网连接。

罗氏公司分子实验室负责人Josh Lauer在接受采访时表示，PRO是LightCycler qPCR系统中的第一个，旨在支持RUO和IVD检测。Lauer说，这可以帮助开发自己的解决方案的实验室将其工作流程从转化研究环境带入临床环境，并补充说，“这实际上是第一次，对这个家族和这种类型的系统来说是相当独特的。”

罗氏LightCycler系统的高级国际产品经理James Lee解释说，希望在RUO测试工作流程模式下更改分析或分析参数的客户可以将PC连接到LightCycler仪器上。Lee说：“利用独立计算机上的软件，你可以更改参数或运行条件。”

Lee说，在IVD工作流程中，该系统就像一个带触摸屏的售货亭一样运行。他说：“一切都被锁定了——你基本上只想输入你的样本，就可以得到结果。”尽管客户也可以通过使用外部计算机在这种模式下修改参数。

对于实验室开发的测试开发，客户还可以简单地控制仪器，使用外部PC和软件运行测试。Lee说：“然后，一旦他们锁定了工作流程，如果他们愿意，他们可以提交LDT以获得IVD标签。”

最初的LightCycler qPCR系统是由犹他大学和爱达荷理工大学开发的，该公司最终称为BioFire Diagnostics。该技术于1997年被授权给Boehringer Mannheim，随后该公司被罗氏诊断收购，罗氏诊断LightCycler系统于1998年正式推出。

据该公司称，罗氏诊断的传统LightCycler480于2005年首次亮相，几年后销售额实现了两位数的增长。480系统有六个颜色通道，而罗氏随后在2012年推出的更小、更便宜的LightCycler 96有四个。该公司最近还通过六种颜色的digital LightCycler扩展到数字PCR。

LightCycler PRO增加了第七个光学通道，旨在进一步支持更多多路qPCR检测和综合征面板的趋势。Lee说：“在过去的30年里，即使没有第七个渠道，LightCycler也能为客户提供服务，但我们很高兴能为用户提供额外的灵活性，因为我们看到越来越多的多面板正在建造中。”

虽然客户可以在PRO系统上运行任何供应商的检测，但Lee指出，罗氏的全资子公司TIB Molbiol销售的是能够创建多重检测的单联检测，如呼吸道感染面板。

Lee说，这些被称为LightMix模块化测试，装在单独的试管中，客户可以将它们混合在一起进行定制测试。罗氏此前与TIB Molbiol合作了近20年，于2021年底收购了这家总部位于德国柏林的公司。

Lauer强调，TIB Molbiol已经开发了200多种RUO分析，并在60个市场上进行了CE-IVD标记。他说：“这种灵活性与LightCycler PRO系统配合得非常好。”

Lauer说，LightCycler PRO在冠状病毒大流行之前就已经在开发中，LightCycler480的这一演变部分受到了与客户深入对话的启发。Lauer说：“我们越来越多地看到，实验室希望知道，他们有一条路可以将他们开发的一些RUO工作流程和测试带到更多的临床空间，并随着市场和法规的发展而发展。”

他说，过去，“很多实验室都购买了LightCycler 480，然后研究IVD平台”进行监管测试。但LightCycler PRO“为实验室提供了一座桥梁，在那里他们可以用一个系统同时完成这两项工作。”

Lee进一步指出，该计划是让TIB Molbiol将他们的分析纳入IVD-R途径，“届时，LightCycler PRO将成为他们部署这些分析的独家工具。”

PRO目前已经获得CE-IVD标记，并处于美国食品和药物管理局510(k)豁免状态。罗氏表示，LightCycler PRO也已经"准备好IVD-R"，这使得它处于通过TIB Molbiol在分子检测领域扩展其检测菜单的有利位置。

LightCycler PRO中的热循环包含了一个被Lee 称为蒸汽循环模块的部分，这类似于用于控制半导体温度的热管技术。

Lee说，历史上，热循环器中的实心铝块往往在边缘处，即金属与环境接触的地方，会有轻微的温差。有了蒸汽循环室，使用蒸汽层来加热和冷却块和样品，他说。这消除了铝块的一部分质量，从而降低了能源需求。

"并且，由于蒸汽会循环，它可以在样品和板子上保持非常均匀的温度，"Lee补充说。

在市场营销方面，劳尔表示罗氏将以LightCycler PRO为临床客户提供服务，但它也可以服务于各种客户，包括那些专注于研究的客户。

此外，尽管生命科学工具领域的一些投资分析师最近指出，在大流行病肆虐之后，仪器购买力出现了下滑，但劳尔表示，PRO在这方面也有一些优势。

鉴于实验室的预算受限，PRO可以帮助他们缩小资本支出，“通过让他们从单一仪器中获得更多的效用，”他说。“我们的客户在COVID之前就一直在要求我们提供这种灵活性，所以无论是在好时期还是坏时期，我们都认为这只是尝试尊重实验室的成本，这样他们就只需要购买一台仪器，而不是多台，”劳尔补充说。

劳尔拒绝对LightCycler PRO的具体成本发表评论，但他说，“众所周知，如果你在市场上看，LightCycler 480相对于其他一些平台来说是一种相对低成本的仪器。”

他还表示，使用PRO的RUO/IVD灵活性在台式系统中也可能会降低客户的成本，因为他们不需要单独的，专用的研究和IVD测试系统。

"LightCycler的生命周期令人印象深刻，"原始技术的主要发明者Carl Wittwer说。

作为一种研究工具首次亮相，该系统将熔解分析和SYBR Green I引入了实时PCR，反过来又使得这种当时新颖的方法得以普及，并为探针和染料提供了更广泛的选择，Witter说。现在，"LightCycler PRO将这种演化继续推进到临床实验室，"他说。

"对于临床实验室来说，能够在研究模式下开发测试，然后无缝过渡到在线诊断测试，是一个核心优势，"Witter说，他在本月早些时候的分子病理学协会会议上有机会看到PRO仪器。

温度控制是"实时PCR仪器具有快速周转时间的最重要特性，"Wittwer说，而PRO中的蒸汽室循环室"最小化了板上的温度异常，同时允许梯度热循环以优化测定。"

捷克科学院基因表达实验室的负责人Mikael Kubista说，未来显示蒸汽室安装对测试精度影响的数据将会有所帮助，Roche的Lee说，该公司计划提供客户推荐和规格。

对于Kubista来说，PRO的一个主要吸引特点是它可以在96孔板模式下分析100微升样本，这被认为是一个大体积。"在诊断中，灵敏度通常很重要，它与分析的样本体积成正比，"他说。

另一方面，当使用384孔板设置时，极低的5微升体积具有节省成本的优势，当灵敏度不是问题或者当筛选许多样本时，他说，比如在COVID-19大流行的高峰期。

LightCycler PRO上的第七个光学通道可能在Roche和TIB Molbiol或第三方供应商未来开始提供七重测定试剂时最有优势，Kubista说，因为"设计和验证高复合测定试剂是耗时和昂贵的。"

英国Anglia Ruskin大学分子医学教授、分子诊断单位负责人Stephen Bustin同意，七重测定试剂设计的挑战可能会限制所有七个通道对研究的实用性，尽管它可能对检测多种病原体有用，例如，在综合症状Panel测试中。

在诊断实验室空间中，"总是需要台式、高通量的诊断仪器，而研究人员希望有廉价、灵活的硬件和用户友好的软件，"Bustin解释。

在IVD模式下运行的热循环仪包括Bio-Rad Laboratories的CFX Opus 96 Dx和Opus 384 Dx系统，以及Opus Dx Deepwell系统，该系统运行体积高达125微升。

Bustin的团队使用Bio-Rad的Opus，以及PCRMax Eco和Bio Molecular Systems Mic在实验室中，他发现它们都"非常均匀，"他说。

"市场上的大多数仪器都表现良好，产生一致、可靠、可重复的结果，"Bustin说，不同系统的主要区别在于大小和成本。软件也"从优秀到非常令人沮丧，"他说，他认为Bio-Rad的Opus系统软件属于"优秀"类别，例如。

除了Roche的LightCycler PRO，Kubista指出，还有其他可以在RUO和IVD模式下运行的系统，如Thermo Fisher Scientific的QuantStudio 5 Dx和QuantStudio 7 Pro Dx。今年早些时候，Thermo描述了将公司带入IVD受规范空间的计划，部分通过推出一系列试剂盒，包括QuantStudio 5 Dx和7 Pro Dx系统的37个CE-IVD标记试剂盒的初始菜单。

Kubista预计在这个双IVD/RUO系统的空间"还有更多的东西要来"，但他指出，独立的qPCR仪器通常仍需要一个单独的提取仪器。集成提取和qPCR的仪器通常只在IVD模式下运行，尽管BD Max系统可能被认为是这个规则的例外。

对于一个可以在IVD模式下运行的独立qPCR仪器，第三方可能可以开发他们通过平台批准的测试，Kubista说，这进一步增加了系统的受规范内容。

此外，PRO的RUO和IVD模式对于有兴趣进行非常规诊断的实验室是一个"巨大的优势，"Kubista说。"新的试剂可能需要几年时间才能获得批准，"他说，因此，对新病原体的快速实验室反应需要实验室开发测试或购买和验证RUO试剂盒以供内部诊断使用。

"有了新的LightCycler PRO，实验室在将初始的LDT/RUO分析升级到IVD时，不需要更换仪器，"他说。